1.實(shí)驗原理
典型的生長(cháng)曲線(xiàn)即可分為潛伏期、指數生長(cháng)期、平頂期及退化衰老四個(gè)部分，其中的三個(gè)不同生長(cháng)時(shí)期（潛伏期、指數生長(cháng)期和平頂期）是每個(gè)細胞系所共有的特征。通過(guò)測定生長(cháng)曲線(xiàn),不僅可以了解培養細胞生物學(xué)特性的基本參數、測定細胞絕對生長(cháng)數、判斷細胞活力，而且也可用于測定藥物等外來(lái)因素對細胞生長(cháng)的影響。本實(shí)驗采用計數法測定細胞生長(cháng)曲線(xiàn)，通過(guò)連續對細胞計數（通常為10天，一般應每次計數3孔細胞取平均值），然后以存活細胞數對培養時(shí)間作圖，即得該種細胞的生長(cháng)曲線(xiàn)。
2.實(shí)驗材料
①小鼠胚胎成纖維細胞或雞胚成纖維細胞,DMEM*培養基。
3.操作步驟
① 細胞接種濃度不能過(guò)多也不能過(guò)少，在合適的濃度下細胞在7~10天內能長(cháng)滿(mǎn)而不發(fā)生生長(cháng)抑制；細胞數量太少，細胞適應期太長(cháng)；數量太多，細胞將很快進(jìn)入增值穩定期，在一段時(shí)間內需進(jìn)行傳代，曲線(xiàn)不能準確反映細胞生長(cháng)情況。同種細胞的生長(cháng)曲線(xiàn)先后測定要采用同一接種密度，這樣才能做縱向比較；不同的細胞也要接種細胞數相同，才能進(jìn)行比較。
② 細胞生長(cháng)曲線(xiàn)是觀(guān)察細胞生長(cháng)基本規律的重要方法。只有具備自身穩定性生長(cháng)特性的細胞才適合在觀(guān)察細胞生長(cháng)變化的實(shí)驗中應用。因而在細胞系細胞和非建系細胞生長(cháng)特性觀(guān)察中，生長(cháng)曲線(xiàn)的測定是最為基本的指標。
③ 細胞生長(cháng)曲線(xiàn)雖然最為常用，但有時(shí)其反映數值不夠精確，有20% ~ 30%的誤差，需結合其他指標進(jìn)行分析。在生長(cháng)曲線(xiàn)上細胞數量增加1倍時(shí)間稱(chēng)為細胞倍增時(shí)間，可以從曲線(xiàn)上換算出。細胞倍增的時(shí)間區間即為細胞對數生長(cháng)期，細胞傳代、冷凍等實(shí)驗多應在此區間進(jìn)行。
④ 細胞在不同培養液中的細胞生長(cháng)曲線(xiàn)和細胞倍增時(shí)間可以直接反映細胞在該種培養液內的增殖速度，是對培養液進(jìn)行選擇的主要依據。通過(guò)個(gè)同培養液內細胞生長(cháng)曲線(xiàn)的差異，篩選出對成纖維細胞和上皮細胞適合的培養液。
⑤通過(guò)對細胞生長(cháng)曲線(xiàn)的繪制，可比較不同的培養液對細胞生長(cháng)曲線(xiàn)變化的影響。在條件允許的情況下，分析培養液中添加不同的生物活性物質(zhì)（如生長(cháng)因子、激素等）對細胞生長(cháng)的影響，從而篩選出合適的細胞培養液。
產(chǎn) 品 推 薦
【SNL-025】NIH/3T3(小鼠胚胎成纖維細胞)
【SNL-006】UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細胞)
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公 司 簡(jiǎn) 介
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