KG-1a（人急性骨髓白血病細胞）

一、細胞基本屬性
細胞名稱(chēng):KG-1a（人急性骨髓白血病細胞）
細胞別稱(chēng):KG-1a
細胞貨號:SNL-159
細胞種屬:人
生長(cháng)情況:懸浮
培養條件:1640+10%FBS+1%雙抗
培養環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細胞培養操作
換液周期:2-3天
培養基體積:T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4（具體情況視細胞生長(cháng)速度及密度決定）
傳代方法:
1.混勻細胞，收集細胞培養基，900rpm離心3-5min，棄上清；
2.加新的*培養基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養瓶里；
3.補足*培養基，將培養瓶放回培養箱靜置培養；
注意事項:部分懸浮細胞會(huì )附著(zhù)瓶底，輕輕晃動(dòng)培養基或者吹打細胞面就會(huì )脫落，不需要胰M消化。建議使用培養皿培養，更適合吹打細胞操作，吹打細胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。
三、細胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規格：200-300萬(wàn)/ml，1ml每管
凍存方法：
1. 離心獲得細胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞；
2. 將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管；
3. 將凍存管轉入程序凍存盒，放入-80度冰箱過(guò)夜，第二天轉入液氮保存；沒(méi)有程序凍存盒的實(shí)驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉入-80度過(guò)夜，第二天轉入液氮保存
注意事項：凍存細胞轉入液氮后及時(shí)復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時(shí)調整實(shí)驗方案
Tips：
1.細胞懸浮圓形生長(cháng)，偶有小聚團；
2.圓形透亮、細胞膜完整的細胞是活細胞，如果無(wú)法判斷，可以取少量細胞用臺盼藍染色后計數確定細胞活率；
3.懸浮細胞密度維持1E5-5E5/ml之間，密度過(guò)低或者過(guò)高可能會(huì )影響細胞狀態(tài)；

我們推薦使用尚恩生物KG-1a（人急性骨髓白血病細胞）*培養基（產(chǎn)品貨號：SNLM-159）作為體外培養的培養基。