293細胞是指來(lái)源于人類(lèi)胎肺緊序細胞的一系列細胞株
更新時(shí)間:2024-01-03瀏覽:674次
293細胞是指來(lái)源于人類(lèi)胎肺緊序細胞的一系列細胞株,具有廣泛應用于生物醫學(xué)研究和生產(chǎn)的潛力。這些細胞起源于1973年從人類(lèi)胎肺提取的一種胎兒肺腺瘤細胞。經(jīng)過(guò)多年的培養和傳代,這些細胞株獲得了一定的穩定性和一致性。特點(diǎn)是其對病毒的易感性。研究者利用這些細胞株,可以選擇性地導入不同的質(zhì)?;虿《?,從而實(shí)現對相關(guān)蛋白的大規模表達和功能研究。此外,可以通過(guò)高效而穩定的轉染技術(shù),用于大規模制備重組蛋白和病毒顆粒。
293細胞的存儲措施:
1.培養基:常用的培養基為DMEM高糖培養基,通常添加10-15%的胎牛血清(FBS)作為生長(cháng)因子。培養基必須去除菌液,并且在4℃保存。
2.培養室條件:需要在無(wú)菌的培養室中培養。一般情況下,培養室的溫度應保持在37℃,濕度約為95%,并且氣體控制為5%CO2和95%空氣。此外,應定期對培養室進(jìn)行消毒,以保持無(wú)菌環(huán)境。
3.細胞傳代:當達到80-90%的密度時(shí),需要進(jìn)行傳代來(lái)保持細胞的正常生長(cháng)。傳代時(shí),使用無(wú)菌的PBS緩沖液洗滌細胞,然后使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液將細胞從培養瓶中剝離,并用新的培養基重新分裝。
4.細胞檢測:為了確保純度和生長(cháng)狀態(tài),應定期對細胞進(jìn)行檢測??梢允褂蔑@微鏡觀(guān)察細胞形態(tài),或者進(jìn)行細胞活力檢測和染色體核型分析。
5.避免污染:污染是眾多細胞培養實(shí)驗中常見(jiàn)的問(wèn)題,因此必須采取措施確保不受細菌、真菌和病毒等污染。遵循無(wú)菌實(shí)驗操作程序,并對培養器具、試劑和培養基進(jìn)行嚴格的消毒和清潔。
6.儲存和保存:可以在液氮中冷凍保存。在進(jìn)行冷凍保存時(shí),應使用適當的凍存液,快速冷凍并儲存于-80℃或更低溫度。在保存期間,需要定期檢查和更換培養條件,以確保凍存細胞的存活率。