raw264.7細胞是一種鼠源的巨噬細胞系

　　raw264.7細胞是一種鼠源的巨噬細胞系，RAW264.7細胞貼壁快，形態(tài)以類(lèi)圓形和不規則為主，一般1～2個(gè)核，少數有3個(gè)核，胞漿伸展時(shí)胞體較大。細胞貼壁緊，胰酶-EDTA難以消化，需要多次消化吹打，也可采用細胞刮法。
 

　　raw264.7細胞培養注意事項：
 

　　1、具有很強的吞噬能力，當吞噬抗原后，細胞會(huì )釋放趨化因子，進(jìn)一步促進(jìn)細胞伸出偽足，增強粘附攀爬能力。細胞吞噬抗原過(guò)多、培養環(huán)境惡劣都會(huì )促進(jìn)該細胞呈現梭形、長(cháng)梭形，鏡下會(huì )看到具有細長(cháng)偽足的小細胞被類(lèi)似上皮的梭形大細胞取代。
 

　　2、每次傳代都很難消化下來(lái)。用力過(guò)大則對細胞損傷較大，這種細胞傳代時(shí)接種密度要大，否則容易使巨噬細胞向終末細胞分化，細胞變成長(cháng)形，并且不能回復，這是培養這種細胞時(shí)需要注意的問(wèn)題。
 

　　3、生長(cháng)時(shí)喜歡結伴。正常生長(cháng)狀態(tài)應該是一小片一小片的生長(cháng)，片片之間不連接，等到長(cháng)到更多更密的時(shí)候會(huì )連成大片，并且會(huì )疊加成層。所以，要很好地控制好細胞的生長(cháng)速度，不要等到疊加成層的時(shí)候再傳代。
 

　　4、傳代后貼壁時(shí)間較短，半小時(shí)就能貼很多，剛貼壁是細胞呈圓形，折光度很好，鏡下觀(guān)察如小珍珠狀一個(gè)個(gè)地散落于瓶底面。生長(cháng)一段時(shí)間后，部分細胞會(huì )變成類(lèi)似四角形，伸出偽足之類(lèi)的。這個(gè)時(shí)候就是提醒你注意傳代了，這部分細胞如再不傳代，很容易就老化掉。
 

　　raw264.7細胞破骨細胞分化：在RANKL的誘導下，RAW264.7細胞可以分化為成熟的破骨細胞，此時(shí)應用破骨細胞特異性的抗酒石酸酸性磷酸染色(TRAP染色)，在有成熟破骨細胞的部位可見(jiàn)紅色的陽(yáng)性反應，所以一般認為RAW264.7是一種前破骨細胞。 向破骨細胞的分化是一個(gè)NF-kb通路依賴(lài)的過(guò)程，先前的大量研究表明，NF-kb通路受到抑制時(shí)，RAW264.7細胞不能向破骨細胞的分化。