游離脂肪酸對非洲綠猴腎細胞凋亡的影響

　　非洲綠猴腎細胞被成功的用來(lái)培養狂犬病疫苗、乙腦疫苗等多種疫苗，在非典期間又為研究冠狀病毒做出貢獻，在醫藥研究種廣泛應用。

　　非洲綠猴腎細胞探討脂肪酸對細胞生長(cháng)的影響。利用不同種類(lèi)不同濃度脂肪酸處理體外培養細胞，利用光鏡觀(guān)察細胞形態(tài)，后經(jīng)Hoechst/PI熒光染色和染色體DNA梯度電泳觀(guān)察細胞形態(tài)改變并確定細胞凋亡；同時(shí)應用蛋白免疫印跡反應檢測淘亡相關(guān)Bc1-2、Bax、Fas、P53和Caspase-3蛋白質(zhì)表達水平。實(shí)驗結果：

　?。?）光鏡觀(guān)察顯示：細胞經(jīng)脂肪酸處理后有形態(tài)上的改變，細胞產(chǎn)生不同程度的破損，這種損壞程度隨脂肪酸濃度遞增而加強。

　?。?）Hoechst/Pl染色表明：飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸都可劑量依賴(lài)性的引起Vero細胞凋亡。隨濃度升高，PI著(zhù)色加深，染色質(zhì)邊集；Hoechst著(zhù)色漸淡。

　?。?）DNA凝膠電泳顯示：經(jīng)脂肪酸處理的細胞DNA呈明顯的梯度分子條帶，表現為典型的凋亡現象，此現象隨處理濃度加大而加重。

　?。?）Western-blot分析結果表明：脂肪酸處理的細胞中，Bcl-2、Bax、Fas、Caspase-3蛋白表達量發(fā)生改變，其中Bax、Fas蛋白表達量隨濃度增加而顯著(zhù)上調，同時(shí)，Bc1-2蛋白含量有所降低；另外，飽和脂肪酸處理組中P53蛋白表達并無(wú)太大差異，而不飽和脂肪酸組P53含量以劑量依賴(lài)性上升。

　　實(shí)驗結果表明，隨著(zhù)脂肪酸濃度的升高，Vero細胞的凋亡程度有所增加，有明顯凋亡現象。由于Bcl-2、Bax、Fas、Caspase-3和P53蛋白表達發(fā)生變化，提示，這些相關(guān)基因在脂肪酸誘導的Vero細胞凋亡過(guò)程中起到了重要的作用。